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從培養(yǎng)的塔瑪亞歷山大藻中提取N-氨基磺?；谞钕偎?2和-3，并化學(xué)轉(zhuǎn)化為GTX2和GTX3混合物，使用制備規(guī)模色譜法進行純化[2]。將純化的GTX2&3在真空下干燥并溶解在過濾的0.5mM HCI水溶液中以得到儲備溶液。通過500 MHz質(zhì)子核磁共振（NMR）光譜、LC-ox-FLD[3]（Figure 1）、LC-MSIMS[4]（Figure 2和Figure 3）、毛細管電泳紫外檢測（CE-UVD）[5]和液相色譜化學(xué)發(fā)光氮檢測（LC-CLND）[6]檢查毒素的純度。

在過濾（0.2 um）中制備CRM-GTX2和3-d溶液，并在pH 3.4下脫氣0.5 mM HCl，并將其分配到預(yù)先填充氬氣的琥珀安瓿中，然后立即火焰密封。每個安瓿含有約0.5 mL溶液。

NRC標準品 CRM-GTX2&3漆溝藻毒素同質(zhì)性

從整個灌裝系列中選擇了代表性數(shù)量的CRM-GTX283-d安瓿，并通過LC-ox-FLD測量GTX2&3濃度。使用ANOVA評估數(shù)據(jù)。

NRC標準品 CRM-GTX2&3漆溝藻毒素穩(wěn)定性

研究表明，GTX2和3溶液儲存在+4°C的密封安瓿中，具有良好的長期穩(wěn)定性，在一年內(nèi)未觀察到任何可檢測到的分解。溶液在冰箱（-12℃或更低）中儲存時也很穩(wěn)定。已確定GTX2&3在室溫下具有良好的穩(wěn)定性，在分析方法的不確定度范圍內(nèi)一個月內(nèi)未觀察到任何可檢測到的分解（LC-MS，單一溶液重復(fù)注射的RSD<1%；n=6）。

NRC標準品 CRM-GTX2&3漆溝藻毒素不確定性

考慮并量化了與CRM-GTX283-d表征相關(guān)的所有合理誤差源。包括與所使用的兩種分析方法相關(guān)的組合不確定度分量（Lehar）?？傮w不確定度估算（UcRw）包括與批次表征（uchar）、儲存期間不穩(wěn)定性（usab）和瓶間變化（usom）相關(guān)的不確定度[8-11]。表3列出了這些組件，并按如下方式組合和擴展：